瘦肉精快速檢測卡原理(5篇)

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瘦肉精快速檢測卡原理篇一

藥理作用、在機體內(nèi)的殘留性及檢測技術

摘要：由瘦肉精引起的中毒事件屢見不鮮，而品種繁多的瘦肉精中鹽酸克倫特羅是使用最普遍的一種，本文從鹽酸克倫特羅的理化性質(zhì)、藥理作用、殘留性、檢測方法等方面詳細介紹其對人體的危害，為我們更好的認識和抵制瘦肉精提供參考。關鍵詞：理化性質(zhì)；藥理作用；毒性；殘留性；檢測方法

瘦肉精是一類藥物，而不是某一種特定的藥物，任何能夠促進瘦肉生長、抑制肥肉生長的物質(zhì)都可以叫做“瘦肉精”。在中國，通常所說的瘦肉精是指克倫特羅，而普通消費者則把此類藥物統(tǒng)稱為瘦肉精。當它們以超過治療劑量5-10倍的用量用于家畜飼養(yǎng)時，即有顯著的營養(yǎng)“再分配效應”——促進動物體蛋白質(zhì)沉積、促進脂肪分解抑制脂肪沉積，能顯著提高胴體的瘦肉率、增重和提高飼料轉(zhuǎn)化率，因此曾被用作牛、羊、禽、豬等畜禽的促生長劑、飼料添加劑。

1.鹽酸克倫特羅的理化性質(zhì)及藥理作用

1.1 理化性質(zhì)

中文名：瘦肉精；克倫特羅；學名：鹽酸克倫特羅(clenbuterol hydrochloride)，又稱氨哮素、克喘素氨雙氯醇胺，化學名稱為羥甲叔丁腎上腺素，是一種平喘藥。該藥物既不是獸藥，也不是飼料添加劑，而是腎上腺類神經(jīng)興奮劑。相對分子量：313.7，分子式：c12-h18-cl12-n2-o·hcl；

圖1 鹽酸克倫特羅結(jié)構式

鹽酸克倫特羅的外觀與性狀：白色或類白色的結(jié)晶粉末，無臭、味苦；熔點：174～175.5°c；溶解性：溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚[1]。1.2 藥理作用

20世紀70年代中后期,克倫特羅作為一種倫特羅1000～3000 μg 具有促進新的、選擇性的β腎上腺受體激動劑逐步應用于臨床試驗,它能夠引起交感神經(jīng)興奮在治療劑量下,強而持久地松弛支氣管平滑肌,口服治療劑量僅為 30～40 μg/d, 對支氣管哮喘和伴隨有逆性氣道梗塞的慢性支氣管炎均有良好的效果,能較長時間地增加肺的最高呼氣量(pefr)，用藥劑量僅為舒喘寧片的1%, 副作用和對心血管系統(tǒng)的作用不明顯?？藗愄亓_可作為支氣擴張劑治療慢性梗塞性肺部疾病,用吸入法給藥,有效劑量可低至12ug；口服效果是特布他林的170倍，對心率和血壓的影響不明顯?？藗愄亓_進入機體后, 與廣泛分布于呼吸道效應細胞膜上 的β2受體結(jié)合,導致受體構型改變,激活腺苷酸環(huán)化酶,催化細胞內(nèi) atp轉(zhuǎn)化為camp,后者激 活camp依賴性蛋白激酶,促使胞漿中游離鈣濃度下降鉀通道開放引起平滑肌松弛而緩解 喘息等癥狀除松弛支氣管平滑肌外克倫特羅也激活β2腎上腺受體克倫特羅能增加神經(jīng)生長 因子的表達而起到保護神經(jīng)系統(tǒng)的作用,也能防止大鼠誘導性肝細胞凋亡。此外,克倫特羅可能具有治療過敏性炎癥的作用并可以在抑制失神經(jīng)肌萎縮的同時不影響或很少影

響正常肌 肉和心臟,促進神經(jīng)修復后肌肉功能的恢復等多種生理功能[2]。

2.鹽酸克倫特羅的毒性 世紀80年代初人們發(fā)現(xiàn)在肉用動物生產(chǎn)中每天使用克倫特羅1000～3000ug具有促進肌 肉發(fā)育和脂肪分解的作用,可明顯提高飼料的利用率和瘦肉率,具有能量重分配的作用。其機理是高劑量克倫特羅通過作用于骨骼肌的β-2腎上腺受體,引起肌肉中環(huán)磷酸腺苷和乳酸濃度 的快速升高,肌糖元濃度下降,加快肌肉蛋白質(zhì)的合成速度長期連續(xù)使用能增加肌肉體積、增加體重。對心肌和后肢肌肉影響最明顯,使左心室比目魚肌和深淺腓腸肌肌纖維顯著性增大。但在豬等肉用牲畜中投喂克倫特羅,即使是屠宰前停藥肝肺中仍可檢出較高濃度的克倫特羅。肉中的克倫特羅可使人體出現(xiàn)多種毒副作用,導致體內(nèi)聚胺濃度升高而繼發(fā)心臟肥大。一次性攝入克倫特羅的量過大,可迅速造成心率過速,對原有心律失常的病人更易發(fā)生心臟反應，嚴重時可出現(xiàn)心肌梗死。同時,由于激活na+質(zhì)譜法

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（gc/ms）可以在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性定量分析，且具有較高的靈敏度，是檢測鹽酸克倫特羅殘留的常用的方法之一。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法可用于飼料、血液、組織中鹽酸克倫特羅的分析，檢測限為0.5μg/kg。與高效液相色譜法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低。因此，中國、歐盟及美國等國家將氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法定為檢測鹽酸克倫特羅的確證性方法。

吳銀良等[13]（2006）建立了同時測定動物肝組織中鹽酸克倫特羅和鹽酸萊克多巴胺殘留量的固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜分析方法，并且鹽酸克倫特羅和鹽酸萊克多巴胺的檢出限分別為0.30μg/kg和1.00μg/kg。王紅等[14]（2007）也簡化了方法，測定了動物肝臟組織中的鹽酸克倫特羅。本方法所需設備昂貴，操作繁瑣，分析檢測前要對分子上羥基、氨基等極性基團衍生化，難以作為常規(guī)方法應用，不能進行現(xiàn)場檢測。

4.3 酶聯(lián)免疫吸附法（elisa）

4.3.1 酶聯(lián)免疫分析

目前，檢測鹽酸克倫特羅較高效的免疫分析技術是酶聯(lián)免疫吸附測定法（elisa）。該方法檢測下限一般1.0μg/l（尿樣）、0.5μg/kg（組織）。使用該法，酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測限尿液為0.3～1.0 ng/ml，組織為0.2～1.0 ng/mg。國內(nèi)外有許多檢測試劑盒，但質(zhì)量不一。酶聯(lián)免疫吸附測定法作為鹽酸克倫特羅殘留量的篩選方法具有操作簡便、準確、投資小、成本低、速度快、靈敏度高、儀器設備簡單等優(yōu)點，適合對活體動物作大批量樣品的快速分析；缺點是仍不能實現(xiàn)現(xiàn)場檢測，且該法檢測結(jié)果假陽性率較高，尤其當樣品中含有抗生素或磺胺類藥物時，會使假陽性率進一步提高[15]。

4.3.2 放射免疫分析技術

ropitar和zimmer首次報道用于β-2腎上腺素能激動劑的放射免疫測定程序和動物組織中鹽酸克倫特羅的藥理學研究。delahaut等[16]描述了建立更為特異的放射免疫方法，其中抗鹽酸克倫特羅的抗體對其他β-2腎上腺素能激動劑的交叉反應小于10%，最低檢測限可達到0.5 ng/g。目前國外已生產(chǎn)出測定鹽酸克倫特羅的試劑盒產(chǎn)品，還建立了類似放射免疫分析法的放射受體分析法，這是用受體代替抗體結(jié)合鹽酸克倫特羅，檢測限可達到2.4 ng/g。

放射免疫分析技術雖然具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、快速、易標準化、技術成熟等優(yōu)點。但儀器價格昂貴和必須使用放射性同位素作為標記物，存在著輻射防護及防止污染的問題，且試劑盒使用時間短，而且每次操作都要做標準曲線，可測量范圍相對較窄，難以實現(xiàn)操作及測量的自動化等。4.4 滴金免疫技術

原理通過鹽酸克倫特羅cl（或萊克多巴胺rac）與cl-bsa（鹽酸克倫特羅-牛血清白蛋白）偶聯(lián)物（或rac-bsa）競爭結(jié)合抗cl（或rac）單克隆抗體-膠體金復合物，使試紙上反應線顏色變化，以判定樣品中cl（或rac）的含量。當檢樣中cl（或rac）濃度低于最低檢測水平時，膠體金中的抗cl（或rac）單抗-膠體金復合物與t線上的cl-bsa偶聯(lián)物（或rac-bsa）結(jié)合，t線呈色與c線相近：當檢樣中cl（或rac）濃度大于5ng/ml 時，抗cl（或 rac）單抗-膠體金復合物與cl（或rac）結(jié)合，t線顯色比c線淺或完全看不到線，且cl（或rac）濃度越高t線顯色越淺，從而作出判定。滴金免疫技術具有簡便易行、快速、試劑安全、特異性高、可單份測定、不需要特殊儀器和設備等優(yōu)點，且金標試劑比酶試劑更穩(wěn)定，冷凍干燥后可長期保存，便于常規(guī)應用。4.5 時間分辨熒光免疫分析技術

時間分辨熒光免疫分析技術（trfia）是一種新型的超微量的非放射性標記免疫分析技術，它以鑭系元素為標記物。時間分辨熒光免疫分析技術集酶標記免疫分析和放射免疫分析等優(yōu)點于一身，且克服了酶標記物的不穩(wěn)定性、化學發(fā)光僅能一次發(fā)光且易受環(huán)境干擾和電化學發(fā)光的非直接標記等缺點，降低了非特異性信號，達到了極高的信噪比，大大地超過了放射性同位素所能達到的靈敏度，且還具有標記物制備方便、儲存時間長、無放射性污染檢測重復性好、操作流程短、標準曲線范圍寬、不受樣品自然熒光干擾、應用范圍廣泛等優(yōu)點。因此，越來越受到人們的關注。目前，國內(nèi)外應用于鹽酸克倫特羅檢測的時間分辨熒光免疫分析技術的報道還較少，隨著技術的越來越成熟，其應用將更廣泛。如果研制成檢測鹽酸克倫特羅的時間分辨熒光免疫分析技術試紙條，將可對鹽酸克倫特羅的殘留進行現(xiàn)場檢測 [16]。

4.6 生物傳感技術

將生物技術與微電子技術相結(jié)合，利用生物體內(nèi)抗原、抗體專一性結(jié)合而導致電化學變化設計成免疫生物傳感器。將cl（或rac）抗體微型化膜固定于換能器（工作電極）表面，測定時在待測樣品溶液中加入已知濃度的酶標激素，cl（或 rac）與標記抗原競爭性地結(jié)合電極上的抗體，使經(jīng)洗滌后的電極與底物溶液接觸，標記酶催化底物發(fā)生相應的化學變化，轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栞敵?，輸出顯示和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)將信息進行數(shù)據(jù)處理和輸出，直接顯示測得cl（或 rac）的含量。

國外已有用生物傳感器技術檢測clb殘留的資料報道, 如 pizzariello andrea 應用分子印跡聚合膜（mip）作為分子識別系統(tǒng)，選擇固相基質(zhì)復合電極（sbmce）作為換能器，微分脈沖電壓電流表（dpv）作為輸出顯示裝置檢測牛肝臟中clb殘留，結(jié)果此方法特異性強，與其他同類物質(zhì)交叉反應低，缺點是反應時間較長，靈敏度還有待于提高[17]。目前酶免疫傳感器的靈敏度達 0.01μg/kg，而且可在幾分鐘之內(nèi)完成檢測全過程。目前研制成功的檢測鹽酸克倫特羅的酶免疫傳感器，檢測限為0.3μg/kg，可 在10 min內(nèi)完成檢測全過程，且傳感器體積?。?5 cm×7 cm×2 cm），便于攜帶和實現(xiàn)現(xiàn)場檢測 [18]。生物傳感器具有選擇性好、響應速度快、樣品用量少、操作簡易、價格低廉、定量準確，且其結(jié)構簡單、體積小、攜帶和使用方便、可以實現(xiàn)連續(xù)的在線檢測和反復使用等優(yōu)點。4.7 毛細管電泳法

gausephol 和 blaschke（1998）應用毛細管區(qū)帶電泳法檢測人尿中鹽酸克倫特羅的殘留，最低檢測限達到0.5 μg/l，而且精確度和準確度均符合生物樣品中殘留物的檢測標準[19]。毛細管區(qū)帶電泳法分離效率可達幾百萬理論塔板數(shù)，操作簡便，快速，所需樣品量極少，而且靈活性大，許多分離參數(shù)可以調(diào)節(jié)，但是所需儀器非常昂貴和復雜。

參考文獻

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瘦肉精快速檢測卡原理篇二

食品與發(fā)酵工業(yè) food and fermentation industries

動物性食品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精殘留危害 及其檢測方法研究進展 張清安 范學輝(陜西師范大學食品工程系,西安,710062 摘 要 介紹了鹽酸克倫特羅(瘦肉精的理化特性,分析了它在動物性食品中殘留對人體和國民 經(jīng)濟所造成的危害,同時又綜述了動物肌肉組織中殘留鹽酸克倫特羅(瘦肉精的各種分析檢測方 法并作了展望。關鍵詞 動物性食品,鹽酸克倫特羅,殘留,檢測方法 第一作者:碩士,講師。收稿時間:2004-06-22 1 鹽酸克倫特羅的理化特性及藥用機 理 1.1 鹽酸克倫特羅的理化特性 鹽酸克倫特羅(clenbuteerol ,clb ,又名克 喘素、氨哮素、雙氯醇胺,俗名瘦肉精,化學名為 α2[(叔丁氨基甲基]242氨基23 , 52二氯苯甲醇 鹽酸鹽,分子式為c12 h18 cl12 n2o·hcl ,相對分 子質(zhì)量為313165。它是一種選擇性β2腎上腺 素受體激動劑,白色或類似白色的結(jié)晶體粉末, 無臭、味微苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于氯 仿,不溶于苯和乙醚,化學性質(zhì)穩(wěn)定,加熱到 172℃才開始分解,經(jīng)260℃油煎5 min才會破 壞減半[1 ,2 ]?？诜笤谖改c道中迅速吸收,10～20 min起效,2～3 h血液濃度達到峰值,作用 維持5 h左右,半衰期為25～39 h ,消除5個半 衰期(消除97 % ,約需5～8 d ,在動物眼睛、毛 發(fā)、肝、肺、腎等組織中易引起蓄積[3 ]。112 鹽酸克倫特羅的藥用機理 鹽酸克倫特羅(clb于1964年首次在美 國合成,屬于β類興奮劑,最初在臨床上主要用 于防治人、畜支氣管哮喘和痙攣。研究證明作 為藥物clb對呼吸、生殖、泌尿、骨骼、神經(jīng)等 系統(tǒng)疾病具有較好治療作用。其機理在傳出神 經(jīng)系統(tǒng),β受體主要分布于血管、支氣管、骨骼 肌和平滑肌等部位,鹽酸克倫特羅與β受體選 擇性結(jié)合后,使β2受體出現(xiàn)興奮效應,主要表 現(xiàn)為平滑肌舒張、通氣改善等[ 4 ]。1984年美國(> 1μg/ kg· 明顯促進動物生長、改善胴體品質(zhì)、提高瘦肉 率,于是歐美等國開始將clb廣泛用于動物飼 一家公司意外發(fā)現(xiàn)高于治療劑量5～10倍以上 d clb添加于飼料飼喂動物后,可 料[5]。20世紀 80年代后期 ,我國部分大專院 校和科研機構也開始向飼料企業(yè)和養(yǎng)殖戶推廣 該物質(zhì)作為飼料添加劑使用。由于 clb能使 飼料轉(zhuǎn)化率和瘦肉率提高 10 %～15 %,骨骼肌 脂肪降低 8%～15 %,所以養(yǎng)殖戶和飼料企業(yè) 經(jīng)常把 clb叫作“瘦肉精”或“肉多素”。其提 高瘦肉率機理在于 clb通過腎上腺素刺激腺 苷酸環(huán)化酶的合成 ,從而升高環(huán)磷酸腺苷(camp的濃度 ,提高激素敏感脂酶的活性 ,加 快脂肪分解 ,使血液中游離脂肪

酸(ffa進入 肌肉量增加 ,進一步為蛋白質(zhì)的合成提供物質(zhì) 基礎;同時 ,clb作為一種植物性神經(jīng)調(diào)節(jié)劑 , 可降低血液中抑制肌肉興奮性的 mg2 +濃度 , 間接促進肌肉興奮 ,改變細胞膜的通透性 ,參與 機體內(nèi)的代謝調(diào)控及營養(yǎng)重新分配 —— ——抑制蛋 白質(zhì)的分解和脂肪的合成 ,進而增加氮的組織 沉積[6]。2 動物性食品中鹽酸克倫特羅的殘留 危害 211 動物性食品中鹽酸克倫特羅的殘留 108

2004 vol.30 no.9(total 201 分析與檢測 由于鹽酸克倫特羅在動物生產(chǎn)中有明顯的 促生長和提高瘦肉率的作用 ,受此利益驅(qū)使國 內(nèi)外 clb在養(yǎng)殖業(yè)中濫用問題非常嚴重。又 因 clb在生產(chǎn)中的用量是治療量的 5～10倍 , 而且持續(xù)添加時間(3周以上 和在體內(nèi)消除半 衰期(25～39h都很長 ,所以極易在動物組織中 蓄積殘留 [6]。在機體的各個組織中 ,clb在眼 和毛發(fā)中殘留的濃度最高 ,如眼中 clb殘留量 比血漿中濃度高 107倍。原因是 clb對不同 組織有選擇性 ,首先選擇有色素沉著的眼組織 和毛發(fā)組織沉積 ,且在眼組織中主要結(jié)合在有 色素沉著的視網(wǎng)膜和脈絡膜上 ,而在無色素的 眼的其他部位則蓄積較少。除了眼和毛發(fā) ,其 他器官的殘留情況是:肺、肝、腎約為血漿濃度 的20～90倍,肌肉和脂肪為3～15倍。如果在 屠宰前沒有休藥期,則殘留量將更高[6 ,7 ]。早在1987,歐盟、美國已宣布禁止使用 今世界范圍內(nèi)已有數(shù)以千計甚至萬計因食用殘 留有瘦肉精的動物源食品而中毒的人員。人食 用殘留有鹽酸克倫特羅的畜產(chǎn)品后表現(xiàn)為肌肉 興奮性增強,有的人中毒后表現(xiàn)為肌肉震顫,重 癥者腓腸肌痙攣;同時引起心肌收縮加強,心率 加快[8 ];對高血壓患者危害更大, clb分解脂 肪成游離脂肪酸進入血液,使血管壁彈性降低, 引起血壓升高,微循環(huán)血管膨脹,壓迫刺激周圍 的神經(jīng),引起頭痛頭暈;引起人內(nèi)臟橫紋肌和平滑肌興奮性增強,表現(xiàn)為嘔吐和腹瀉;又因體內(nèi) k+、ca2 +、na +和mg2 +等濃度的平衡破壞,導 致細胞膜生物電位去極化能力增強,復極化能 力減弱,細胞膜對離子通透性改變,心電圖可呈 “t波倒置或底平”, st段下移等,若患者發(fā)生 死亡,則死于心臟舒張期或心肌梗死。clb中 毒的患者群中,對患心、腦血管疾病、糖尿病、甲 狀腺亢進、青光眼、前列腺肥大者可造成威脅生 clb作為獸用飼料添加劑我國政府也于,1997 年在“濃牧發(fā) [1997 ]3號《關于嚴禁非法使用獸 藥的通知》 ”中已明確禁止其在飼料中添加使 用。但也有許多國家并沒有確定動物性產(chǎn)品中 clb的最大殘留限量(mrl。美國

食品藥物 管理局(fda和世界衛(wèi)生組織(who建議鹽 酸克倫特羅在動物組織中最高殘留限量為 :肉 012μg/ kg、肝 016μg/ kg、腎 016μg/ kg、脂肪 012μg/ kg、乳 0105μg/ kg;部分歐盟成員國如英 國規(guī)定可食性組織中 mrl值為 015μg/ kg ,荷 蘭規(guī)定牛、馬肝臟組織中 mrl值 015μg/ kg[8]。212 動物性食品中鹽酸克倫特羅的殘留危害 雖然鹽酸克倫特羅的毒性并不是很強 ,小 鼠、豚鼠靜脈注射的半數(shù)致死量分別是每公斤 體重 2716 mg和 1216 mg[2]。但是由于它的半 衰期長 ,在體內(nèi)代謝慢 ,極易蓄積殘留于動物體 內(nèi) ,在動物肝臟中 clb平均濃度可達 45 mg/ kg ,也就是說 ,按臨床最高治療劑量每天 018 μg/ kg計算 ,人食用 100 g被 clb污染的動物 肝臟攝入體內(nèi)的 clb就相當于一次治療劑量 的 10倍以上 ,因而極有可能通過食物鏈使人體 中毒而對健康構成威脅 [9]。自上世紀 80年代 中期歐美國家發(fā)現(xiàn)瘦肉精的毒副作用以來 ,至 命的惡果。孕婦中毒又可導致癌變、胎兒致畸 的嚴重危害性 [ 10 ,11 ]。歐盟成員國已將 clb殘 留作為肉品進口必檢項目 ,因而這也成了 wto成員國之間進行國際貿(mào)易的技術壁壘。由此可見 ,clb的非法使用及殘留不但嚴重地 威脅著消費者的健康 ,而且也影響著一個國家 的對外貿(mào)易和聲譽。我們應借鑒美國、歐盟等 國家在動物產(chǎn)品生產(chǎn)和食品工業(yè)上實施的良好 生產(chǎn)規(guī)范(gmp、危害分析與關鍵控制點(haccp和全過程質(zhì)量控制(ikb等管理經(jīng) 驗 ,并結(jié)合我國動物產(chǎn)品生產(chǎn)的特點 ,引入全過 程質(zhì)量控制的新理念 ,加強養(yǎng)殖、屠宰加工和銷 售環(huán)節(jié)的質(zhì)量管理 ,減小甚至消除 clb殘留造 成的危害 [12 ]。3 動物性食品中鹽酸克倫特羅的檢測 方法

當前 ,造成鹽酸克倫特羅屢禁不止的原因 之一就是國內(nèi)外檢測 clb的方法、手段還不完 善 ,還沒有建立宰前監(jiān)測體系和準確、迅速、方 便、精確的檢測方法 ,從而使不法分子有機可 乘。目前國內(nèi)外用于檢測動物性食品中鹽酸克 倫特羅的方法主要有以下幾種。109 2004年第 30卷第 9期(總第 201期

分析與檢測 國已將 hplc法作為檢測飼料中 clb殘留的 半確證法 ,將 gc2ms法定為確證性方法 ,主要 用于最后確認和仲裁 ,而對于動物性食品中 clb殘留尚未有檢測標準。hplc法中常用的 檢測器有電化學檢測器、紫外檢測器;hplc法 優(yōu)點是檢測精確度高 ,其最低檢測限范圍為 1～15 ng/ g ,而且假陽性率低 ,與 gc2ms法相 比樣品不必衍生;缺點是檢測過程煩瑣、檢測時 間長 ,需貴重儀器、難

于操作、價格昂貴 [18 ]。gc2ms法優(yōu)點是能在多種殘留物同時存在情 況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。與 hplc相比 , gc2ms法靈敏度更高 ,假陽性 率更低 ,其缺點也同 hplc法一樣。ce法非 常適用于難以用傳統(tǒng)的液相色譜法分離的離子 化樣品的分離與分析。優(yōu)點是有很大的靈活 性 ,許多分離參數(shù) ,如緩沖液的組成和 ph值 , 毛細管的類型以及所使用的電場的波形都可以 調(diào)節(jié) ,操作簡便 ,所需樣品量極少 ,一般只需幾 納升。缺點是檢測時間仍很長 ,不能滿足在線 檢測 ,儀器復雜、缺乏配套的檢測器 [19 ]。((tlc [4 ,12 ,15～17 ] gc2ms、毛細管區(qū)帶電泳法。其中前3種方法最常用,中、薄層色譜法f tir 2gc((ce、高效液相 傅立 的 r2biopharm公司分別開發(fā)出了檢測肉品、飼 色譜 2質(zhì)譜聯(lián)用法

(hplc2ms、氣相色譜 2料中 clb殘留的 el isa試劑盒 ,但其價格費 葉紅外聯(lián)用法 用極高 ,每檢測一份豬肉是否含 clb的費用是 1 200～1 400元。正因如此 ,國內(nèi)許多科研院 311 感官識別 [ 13 ,14 ] 凡飼喂鹽酸克倫特羅比較嚴重的豬宰后肉 色特別鮮紅、后臀肌肉飽滿突出 ,脂肪非常薄 , 肉皮緊貼著瘦肉、瘦肉纖維比較疏松 ,肉皮與瘦 肉之間無肥肉(肥膘厚度不到 115 cm ,有時有 少量“汗水”滲出肉面 ,這種肉就很可能含有 clb;而一般健康肉淡紅色 ,肉質(zhì)彈性好 ,也不 會有 “出汗”現(xiàn)象。通過這種感官識別方法就可 以快速、簡單、定性對動物性食品中有無 clb 作出初步判定。312 色譜檢測技術 目前 ,檢測 clb殘留常用的色譜技術有高 效液相色譜(hplc、氣相色譜 2質(zhì)譜聯(lián)用法 313 免疫分析技術(ia 標記免疫分析技術是 “邁向 21世紀的醫(yī)學 檢驗技術”之一 ,其發(fā)展趨勢是 :新標記物的發(fā) 110

2004 vol.30 no.9(total 201 展與聯(lián)合應用、單克隆以及基因工程抗體的應 用和免疫放大技術 ,可明顯提高檢測特異性 ,靈-敏度可達 zepto(10-20、yocto(10 24 水平,即 可實現(xiàn)分子水平的檢測 [20 ]。目前 ,用于檢測 clb殘留的免疫分析技術主要有放射免疫分 析技術(ria和酶免疫分析技術(eia。國外 已生產(chǎn)出運用 ria測定 clb殘留的試劑盒 , 還建立了類似放射免疫分析法的放射受體分析 法 ,這種方法是用受體代替抗體結(jié)合 clb ,檢 測限可達 214 ng/ g ,國內(nèi)在此方面的研究尚屬 空白 [21～23 ]。對于 eia分析技術中檢測 clb 殘留較高效的是酶聯(lián)免疫吸附技術(el isa。目前 ,英國的 randox laboratories ltd和德國 所都在開發(fā)研制檢測 clb殘留的 e

l isa試劑 盒。據(jù)報道 ,中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食 品安全研究所和上海市畜牧獸醫(yī)站與上海賽群 生物科技有限公司聯(lián)合開發(fā)研制的瘦肉精 el isa檢測試劑盒也已分別問世 ,且后 2家單 位聯(lián)合開發(fā)產(chǎn)品已投入商品化生產(chǎn)及實際應用 中。經(jīng)與同類進口試劑進行對比試驗 ,結(jié)果顯 示國產(chǎn)試劑盒在靈敏度、準確性上都已達到進 口試劑盒的水平,而在穩(wěn)定性、回收率方面要優(yōu) 于進口試劑盒 ,且價格費用要下降很多 [24 ]。el isa的優(yōu)點是靈敏度高、操作簡便、檢測迅 速;缺點是仍不能實現(xiàn)在線檢測 ,而且假陽性率 較高。314 綜合化學法 根據(jù) clb的化學結(jié)構與性質(zhì) ,參照國家藥 典標準方法可以進行綜合鑒別 [25 ]。因其溶于 水和乙醇 ,故可以用水進行提取。clb可顯示 芳香一胺類的鑒別反應 ,也可以顯示氯化物的 鑒別反應 ,同時 ,用分光光度計檢測 ,可在 243 nm與 296 nm的波長處得到最大吸收。綜合分 析可以判定動物性食品中是否存在 clb類物 質(zhì) ,且該法不需昂貴的儀器與試劑 ,也沒有復雜 的樣品前處理 ,操作簡單 ,無疑是基層衛(wèi)生防疫 分析與檢測 clb的高效在線檢測 [15 ] 原理為當分子識別部分與被識別物質(zhì)相接觸 光變化以及直接 誘導電信號 ,而后利用電學測量方法進行檢測、控制和顯示輸出。國外已有用生物傳感器技術 檢測 clb殘留的資料報道 [26] ,其優(yōu)點是特異 性強、假陽性率低、高效、方便 ,國內(nèi)未見有開發(fā) 成功的相關報道?？傊?,盡快研制出高效、方 便、迅速的 digfa試紙條和生物傳感器是檢 測 clb殘留較為理想的方法和途徑 ,也是今后 發(fā)展趨勢。及準確度均很理想。如果研制出檢測。對于生物傳感器,其 時,可發(fā)生化學變化、熱變化、clb的13 閆紅軍,馬巧娥.提高衛(wèi)生知識水平嚴防 中毒[j ].動物醫(yī)學進展,2003 ,24(5 :127 “瘦肉精” 滴金免疫試紙條或滴金免疫測試盒則可實現(xiàn) 14 李 杰.瘦肉精殘留危害與動物性食品安全 [j ].中國飼料 ,2003 ,4 :31～32 工作者初選 clb殘留的有效方法 ,但最低檢測 限較高 ,靈敏度低。4 鹽酸克倫特羅檢測技術的未來趨勢 和發(fā)展方向

根據(jù)目前國內(nèi)外檢測 clb各種方法的進 展情況以及 clb濫用及殘留的嚴峻性 ,建立一 種克服上述各種檢測方法缺點的簡便、快速、精 確、可實現(xiàn)在線檢測的 clb技術勢在必行。滴 金免疫技術(digfa 和生物傳感器技術(biosensor ,bs是 2種快速、高效的殘留物分析 技術。其中 digfa技術已成功的運用于早孕 診斷、弓形蟲病診斷、血吸蟲病診斷等 ,靈敏

度 參考文獻 1 張琪玉 ,李海云 1鹽酸克倫特羅中毒 40例分析 [j ]1中國醫(yī)師雜志 ,2002 ,4(9 :1 035～1 036 2 蔣巧燕 1鹽酸克倫特羅中毒 11例分析 [j ]1醫(yī)學理 論與實踐 ,2002 ,15(4 :434 3 陳永壯 “瘦肉精”中毒的流行病學特征及防治對策 1 [j ]1中國衛(wèi)生監(jiān)督雜志 ,2002 ,9(5 :280～281 4 劉國艷 ,柴春彥 1如何全面認識 “瘦肉精” [j ]1動物 科學與動物醫(yī)學 ,2002 ,19(6 :1～3 5 elliott c t , mccaughey w j , crooks s r h et al1residues of clenbuterol in cattle receiving therapeu2 tic doses:implicationsfor differentiating between legal and illegal use[j ]1 vet q ,1995 ,17 :100～102 6 凌明亮 ,黃仁術 1瘦肉精的危害及檢測方法 [j ]1安 徽農(nóng)學通報 ,2003 ,9(4 :87～88 7 sauern m j ,pickett r j h ,limer s et al1distribution and elimination of clenbuterol in tissues and fluids of calves following prolonged oral administration at a grow-promoting dose[j ]1j vet pharmacol therap , 1995 ,18 :81～86 8 林榮泉 1瘦肉精對人的危害及防治 [j ]1肉類工業(yè) , 2002 ,7 :30～31 9 張 玲 ,邵春花 1瘦肉精的危害及其預防措施 [j ]1新疆農(nóng)墾科技 ,2003 ,6 :19～20 10 汪令四 1含“瘦肉精”畜產(chǎn)品對人體健康的危害 [j ]1畜牧獸醫(yī)雜志 ,2002 ,21(4 :29～30 11 張 呤 ,陳一農(nóng) 1克倫特羅藥理作用的研究進展 [j ]1海峽藥學 ,2002 ,14(5 :10～11 12 宋興國 ,陳 杰.瘦肉精的快速檢測方法 [j ].山東 畜牧獸醫(yī) ,2003 ,3 :28～29 15 黃傳峰 ,李曉華 ,吳宜群.克倫特羅檢測方法進展 [j ].中國衛(wèi)生檢驗雜志 ,2002 ,12(5 :634～636 16 黃宏南 ,謝劍峰.鹽酸克倫特羅(瘦肉精 的檢測方 法進展 [j ].福建畜牧獸醫(yī) ,2003 ,10 :27～28 17 蔡玉枝 ,羅曉燕 ,蘇文周.高效液相色譜法測定豬 組織中鹽酸克倫特羅殘留量 [j ].中國衛(wèi)生檢驗雜 志 ,2002 ,12(2 :193～194 18

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分離與提純 表 3 不同抗氧劑對豬油的抗氧化 作用(pov值 mmol/ kg 樣 品 時間 /d 0 48 013 %提取液 01062 01068 01287 013 %抗壞血酸 01062 01089 01301 013 %檸檬酸 01062 01132 01413 013 %edta 01062 01066 01279 3 結(jié) 論 比較了幾種不同提取方法的提取效果 ,實 驗顯示 :體積分數(shù) 75 %乙醇提取法提取率較 高 ,提取物比較容易濃縮和干燥 ,是一種較好的 提取方法。柿葉黃酮類化合物的抗氧化性較強 ,通過 對豬油的抗氧化效果試驗發(fā)現(xiàn) :其抗氧化效果 比抗壞血酸和檸檬酸稍強。參考文獻 1 譚仁祥 1植物成分分析 [m]1北京 :科學出版社 , 2002.486～502 2 萬素英 ,趙亞軍 ,李 琳等 1食品抗氧化劑 [m]1北 京 :中國輕工業(yè)出版社 ,1998 study on extraction method and antisong changchun bao qingsheng(department of basic courses , anhui technical teachers college , bengbu , 233100 2oxidation property of flavonoid compound from leaves of diospyros kaki abstract the extraction method of flavonoid in leaves of diospyros kaki was studied1 the opti2 mum extracting process was put forward , and anti2oxidation property of the extract from the leaves of diospyros kaki was studied1 the results showed that the optimum extracting technical process was 75 % alcohol1 effect of flavonoid from the leaves of diospyros kaki was higher than ascorbic acid and citric acid1 key words leaves of diospyros kaki , flavonoid ,extraction method ,antioxidant(上接第 111頁 和國藥典 [m].北京 :化學工業(yè)出版社 ,1995.62923 彭笑蓉 ,孫文梅.競爭酶標免疫法檢測“瘦肉精” ～630 [j ].河北畜牧獸醫(yī) ,2003 ,19(4 :42～43 26 pizaariello a , stred’ansky m , stred’ansky s et al.24 張?zhí)K華 ,黃士新.國產(chǎn)“瘦肉精” el isa試劑盒與a solid binging matrix/ molecularly imprinted poly2 同類進口試劑盒的對比試驗 [j ].上海畜牧獸醫(yī)通mer-based sensor system for the determination of 訊 ,2003 ,4 :20～21 clenbuterol in bovine liver using differential-pulse 25 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共

voltametry [j ].sensors and actuators b ,2001 ,76 : 286～294 hazard of clenbuterol residual in animal food and research progress on its determination method zhang qing’an fan xuehui(department of food engineering ,shaanxi normal university , xi’an , 710062 abstract in this paper we introduced the physicochemical characteristics and mechanism of clen2 buterol ,analyzed its hazard to human health and national economy , and summarized testing methods of residual clenbuterol in animal food1 key words animal food ,clenbuterol ,residual ,determination method 119 2004年第 30卷第 9期(總第 201期

瘦肉精快速檢測卡原理篇三

xxx瘦肉精(鹽酸克倫特羅)專項整治工作方案

縣食品藥監(jiān)局、公安局、農(nóng)業(yè)局、衛(wèi)生局、工商局、質(zhì)監(jiān)局、屠

宰辦

為確保我縣肉品質(zhì)量安全，保障人民群眾身體健康和生命安全，維護社會和諧穩(wěn)定，決定在全縣繼續(xù)深入開展瘦肉精專項整治工作，現(xiàn)提出如下工作方案：

一、指導思想

以鄧小平理論和“三個代表”重要思想為指導，認真貫徹落實科學發(fā)展觀，圍繞全面建設“平安獲嘉”、構建社會主義和諧社會的要求，按照“標本兼治、著力治本”的工作方針，堅持集中整治與制度建設、加強監(jiān)管與規(guī)范引導、打擊違法與扶優(yōu)扶強相結(jié)合，大力整治違法生產(chǎn)、經(jīng)營和使用瘦肉精等突出問題，全面提高肉品質(zhì)量安全保證水平，確保人民群眾飲食安全。

二、整治目標

通過整治，使非法生產(chǎn)、銷售和使用瘦肉精等違法行為得到有效遏制，飼料生產(chǎn)和經(jīng)營、生豬養(yǎng)殖和屠宰、豬肉加工和流通以及餐飲等環(huán)節(jié)的秩序得到進一步規(guī)范，力爭在全縣范圍內(nèi)基本杜絕生豬養(yǎng)殖違法使用瘦肉精等禁用藥物的現(xiàn)象，確保人民群眾吃上“放心肉”。

三、整治時間

2011年x月x日至2011年x月底。

四、整治內(nèi)容

以豬飼料及飼料添加劑生產(chǎn)加工和經(jīng)營單位、生豬養(yǎng)殖場（戶）和生豬定點屠宰企業(yè)為主要對象，開展全面排查和專項檢查，嚴厲打擊非法生產(chǎn)加工、銷售、使用瘦肉精等禁用藥物的行為。

五、整治重點

（一）查處飼料生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)生產(chǎn)、銷售含瘦肉精等禁用藥

物的飼料及添加劑的行為，堅決取締非法生產(chǎn)、銷售瘦肉精等禁用藥物的窩點和網(wǎng)絡。

（二）查處生豬養(yǎng)殖場（戶）使用瘦肉精或含瘦肉精等禁用藥物的飼料及添加劑喂養(yǎng)生豬的行為，在規(guī)模養(yǎng)殖場（戶）中推行生豬質(zhì)量安全告知承諾制度。

（三）落實生豬宰前尿液檢測制度，督促屠宰企業(yè)建立健全屠宰加工進出臺賬、檔案。

（四）在農(nóng)貿(mào)市場、超市等流通環(huán)節(jié)和餐廳、食堂等餐飲環(huán)節(jié)落實豬肉進貨臺賬和索證索票制度。

六、職責分工

農(nóng)業(yè)部門負責飼料及飼料添加劑生產(chǎn)加工、經(jīng)營和生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)的整治。在飼料生產(chǎn)經(jīng)營環(huán)節(jié)，要嚴厲打擊在豬飼料中添加瘦肉精、無機砷等有害物質(zhì)的違法行為，會同工商部門取締無質(zhì)檢設備、無技術人員、不能保證產(chǎn)品質(zhì)量的飼料加工單位（點）。在生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，要嚴厲打擊飼養(yǎng)戶和養(yǎng)殖場使用瘦肉精等違法行為；對宰前檢測呈陽性的生豬進行源頭查處，并及時向有關部門通報處理結(jié)果；建立養(yǎng)殖場（戶）使用禁用藥物的“黑名單”制度，落實養(yǎng)殖場（戶）告知承諾制度。對出縣的生豬，必須進行瘦肉精抽檢；加強對外地貨源生豬檢疫的監(jiān)督管理，對問題較多的產(chǎn)地，及時督促購銷企業(yè)調(diào)整貨源。

縣生豬定點屠宰管理部門負責生豬屠宰環(huán)節(jié)的整治。加強對生豬屠宰企業(yè)的監(jiān)管，督促各場、點做好宰前瘦肉精檢測工作；會同農(nóng)業(yè)部門對定點屠宰場(點)瘦肉精的宰前檢測和檢測呈陽性生豬無害化處理制度的落實情況開展監(jiān)督檢查；會同農(nóng)業(yè)、工商等部門取締私屠濫宰行為。

質(zhì)量技監(jiān)部門負責非法生產(chǎn)加工瘦肉精行為的排查和肉制品加工企業(yè)的整治。對排查發(fā)現(xiàn)非法生產(chǎn)加工瘦肉精的，要及時移送有關部門從嚴查處。同時，加強對以鮮豬肉為原料生產(chǎn)加工肉制食品企業(yè)的監(jiān)管，加大對豬肉制品監(jiān)督抽查和質(zhì)量問題的查

處力度，督促企業(yè)加強原料進貨檢驗和產(chǎn)品出廠檢驗。

工商部門負責對農(nóng)貿(mào)市場、超市等流通環(huán)節(jié)肉類經(jīng)營者的監(jiān)管。重點檢查經(jīng)營者進貨臺賬和索證索票制度的落實情況，切實防止問題豬肉的流通。同時，要加強對非法銷售瘦肉精等禁用藥物行為的監(jiān)管，嚴厲打擊不法行為。

衛(wèi)生部門負責餐飲消費環(huán)節(jié)的整治。依法對餐廳、食堂等餐飲單位使用的豬肉開展瘦肉精等禁用藥物的抽檢，督促餐飲單位建立肉品采購索證索票、進貨登記和品質(zhì)驗收制度，專人負責驗收，確保購進豬肉均有生豬檢疫、檢驗合格證明，做到加工制作食品不使用來路不明和無檢疫、檢驗合格證或檢疫、檢驗不合格的豬肉，以及病死豬肉或私自屠宰的豬肉。同時，引導自辦筵席的農(nóng)村家庭通過正規(guī)渠道采購豬肉。

公安部門負責涉嫌生產(chǎn)、銷售和使用瘦肉精等禁用藥物犯罪案件的偵查。要依法嚴肅查處各類涉嫌瘦肉精等禁用藥物犯罪的案件，對事實清楚、證據(jù)充分的，及時移交檢察機關審查起訴。同時，對一些重大案件，要及時主動介入調(diào)查。

食品藥品監(jiān)管部門負責食品安全的綜合監(jiān)督、組織協(xié)調(diào)，并依法組織查處重大事故。同時，要加強對藥品生產(chǎn)經(jīng)營企業(yè)生產(chǎn)、銷售鹽酸克侖特羅的監(jiān)管。縣食品安全委員會辦公室要認真做好瘦肉精專項整治的牽頭協(xié)調(diào)工作，加強與有關部門的聯(lián)系溝通，及時掌握專項整治的動態(tài)情況，組織有關部門查處整治中出現(xiàn)的新情況、新問題。

七、工作要求

（一）統(tǒng)一思想認識。確保肉品質(zhì)量安全，是食品安全工作的一項重要內(nèi)容，事關人民群眾身體健康和生命安全，事關社會和諧穩(wěn)定大局。各有關部門務必要把思想統(tǒng)一到建設“平安獲嘉”、構建社會主義和諧社會的決策部署上來，把這次整治活動作為當前的一項重要任務，高度重視，周密部署，迅速行動，扎扎實實地抓好各項工作。

（二）加強組織領導。本次瘦肉精專項整治工作，由縣食品安全委員會辦公室牽頭，農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、工商、質(zhì)量技監(jiān)、屠宰辦、公安、食品藥品監(jiān)管等部門共同組織實施。各有關部門要各司其職，各負其責，密切配合，共同做好專項整治的各項工作。

（三）認真開展普查。各有關部門要組織力量對飼料生產(chǎn)加工、生豬養(yǎng)殖場、生豬屠宰單位等進行全面檢查，做到不留死角，不留盲縣。重點檢查生豬養(yǎng)殖、屠宰、流通、消費和肉制品生產(chǎn)加工等各個環(huán)節(jié)相關單位的養(yǎng)殖檔案、屠宰臺賬、肉品進貨臺賬和承諾制度、瘦肉精宰前檢測制度、索證索票制度的落實情況，以及飼料生產(chǎn)加工記錄、瘦肉精宰前檢測記錄，并在此基礎上建立健全監(jiān)管檔案。對檢查中發(fā)現(xiàn)的不規(guī)范生產(chǎn)經(jīng)營行為要督促及時糾正，對觸犯法律的，要發(fā)現(xiàn)一起，查處一起，決不姑息。

（四）搞好宣傳動員。各有關部門要加強宣傳教育，動員社會各界關心、支持、參與瘦肉精專項整治行動。有關部門要向社會公布舉報電話，發(fā)動群眾舉報非法生產(chǎn)、銷售、使用瘦肉精和飼料及飼料添加劑，以及非法屠宰、銷售不合格豬肉和使用不合格豬肉生產(chǎn)加工食品等違法行為。

（五）加強監(jiān)督檢查?？h食品安全委員會辦公室要會同農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、工商、質(zhì)量技監(jiān)、屠宰辦、公安、監(jiān)察、食品藥品監(jiān)管等有關部門組成督查組，對整治工作進行督查；同時，組織人員對重點地縣、重點環(huán)節(jié)進行暗訪。對宰前瘦肉精檢測等工作和責任不落實的單位，要進行通報批評；對因工作不力，發(fā)生嚴重瘦肉精中毒事件的，要依法依紀追究有關負責人和責任人的責任。整治工作結(jié)束后，各有關部門要對專項整治工作進行總結(jié)，并將總結(jié)報告于20xx年x月x日前報縣食品安全委員會辦公室，縣食品安全委員會辦公室匯總后報市食品安全委員會辦公室。

瘦肉精快速檢測卡原理篇四

鹽酸克倫特羅快速檢測

摘 要

本實驗采用了百睿tm鹽酸克倫特羅快速檢測卡對樣品進行定性檢測。鹽酸克倫特羅快速檢測卡適用于尿樣、瘦肉、肝臟、肺臟、腎臟和飼料等樣本中鹽酸克倫特羅的測定。檢出限為3ng/ml（3ppb）。關鍵詞 鹽酸克倫特羅快速檢測卡

定性

檢出限

前 言

鹽酸克倫特羅(clenbuterol,clb),又名瘦肉精,分子式為c12h18cl2n2o?hcl,藥品名為克喘素、氨哮素等,為白色或類白色的結(jié)晶粉末,無臭、味苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚和苯,化學性質(zhì)穩(wěn)定;它是一種人工合成的b-腎上腺素受體激動劑,具有擴張支氣管的作用,常用來防治哮喘、肺氣腫等肺部疾病(mersmann,1998)。當其應用劑量達到治療量的5~10倍時,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉積減少,因此將其俗稱為瘦肉精,在養(yǎng)豬業(yè)中一些非法使用者將其作為一種生長促進劑添加到飼料中(kuip-er,1998),用以改善胴體的品質(zhì),但同時也造成了豬肉中鹽酸克倫特羅的殘留。當人們食用含有鹽酸克倫特羅殘留的肉品后,常常造成心動過速,低血鉀,低磷酸鹽血癥,肌肉震顫,頭暈,口干,失眠甚至于癱瘓等中毒癥狀,對心臟病患者更有生命危險。國家農(nóng)業(yè)部農(nóng)牧發(fā)[2002]1號文5關于發(fā)布食品動物禁用的獸藥及其他化合物清單的通知6中,鹽酸克倫特羅被列為所有食品動物禁止使用。

1實驗步驟

（1）使用前將待測樣本溶液恢復至室溫

（2）取出檢測卡平放，用移液槍吸取待測樣品溶液100ul，垂直加于加樣孔，開始計時

（3）結(jié)果應在3~5min讀取，其他時間判讀無效，根據(jù)示意圖判定結(jié)果。

【結(jié)果判斷】

陰性（-）：兩條紫紅色條帶出現(xiàn)。表示樣品中鹽酸克倫特羅濃度低于3 ng/ml，或不含有。

陽性（+）：檢測t線無顯色，則表示樣品中鹽酸克倫特羅濃度高于3 ng/ml。

無效：未出現(xiàn)質(zhì)控c線，表明操作過程不正確或檢測卡已失效。實驗結(jié)果

實驗結(jié)果如下圖 1

由圖可知，左邊表示樣品中鹽酸克倫特羅濃度低于3 ng/ml，或不含有鹽酸克倫特羅；右邊樣品中鹽酸克倫特羅濃度高于3 ng/ml。

3結(jié)果與討論

3.1實驗原理

若待測樣品溶液中不含鹽酸克倫特羅,當樣品溶液進入測試端,鹽酸克倫特羅金標單抗在硝酸纖維素膜上層析泳動,被硝酸纖維素膜上檢測印跡處的鹽酸克倫特羅-bsa偶聯(lián)物攔截形成鹽酸克倫特羅-bsa偶聯(lián)物)金標鹽酸克倫特羅單抗 復合物,并在該印跡處形成紅色的條帶(檢測線);測試端多余的金標鹽酸克倫特羅單抗在硝酸纖維素膜上繼續(xù)層析可被對照印跡羊抗鼠igg單克隆抗體捕獲形成紅色的對照條帶(對照線)。當待測尿樣中含有一定量的鹽酸克倫特羅時,鹽酸克倫特羅與鹽酸克倫特羅金標單抗形成復合物,從而與硝酸纖維素膜上的鹽酸克倫特羅-bsa偶聯(lián)物形成競爭,抑制了檢測印跡處包被的鹽酸克倫特羅-bsa偶聯(lián)物捕獲鹽酸克倫特羅金標單抗的量,而不能在檢測線形成紅色印跡或形成顏色較淺的紅色印跡,多余的盒標鹽酸克倫特羅單抗繼續(xù)層析在對照印跡處形成對照線。根據(jù)該反應模式,檢測線顏色深淺與樣品中鹽酸克倫特羅含量呈負相關,即檢測線顏色越淺表示樣品中鹽酸克倫特羅含量越高。3.2 試紙條組成

1.樣品墊的作用是盡快地將加樣孔中的樣品吸附到試紙中去，以利于繼續(xù)加樣； 2.結(jié)合墊中則是含有膠體金標記的鹽酸克倫特羅單抗；

3.硝酸纖維素膜上則預先標記了兩種物質(zhì)，在檢測線處標記的是鹽酸克倫特羅-bsa偶聯(lián)物。

4.吸收墊一般由吸水紙構成，主要作用是保持從加樣墊到吸收墊之間的毛細管作用力[1]。

參考文獻

[1] 姜艷彬，孫冠如，王海，等.鹽酸克倫特羅膠體金快速檢測試紙條的研制[j].中國畜牧獸醫(yī).2010(10): 109-113.

瘦肉精快速檢測卡原理篇五

豬繁殖與呼吸綜合癥抗體快速檢測試劑盒

——（膠體金法）使用說明書

1、檢測原理

豬藍耳病抗體快速檢測試劑盒（膠體金法），系采用膠體金免疫層析技術，檢測樣品（血清、血漿或全血）中藍耳病抗體的方法。在玻璃纖維紙上預包被金標記滅活豬藍耳病抗體（au-agl）,在硝酸纖維素膜上檢測線和對照線處分別包被豬藍耳病抗原（ag2）和兔抗豬藍耳病抗體。當檢測樣品為陽性時，樣品中豬藍耳病抗體與膠體金標記豬藍耳病抗原（au-agl）結(jié)合形成復合物，由于層析作用復合物沿紙條向前移動，經(jīng)過檢測線時與預包被的豬藍耳病抗原(ag2)形成“au-agl-豬藍耳病抗體-ag2-固相材料”免疫復合物而凝聚顯色，游離金標記抗原則在對照線處與兔抗豬藍耳病抗體結(jié)合而富集顯色。陰性樣品則僅在對照線處顯色。操作簡便，快速，結(jié)果直觀、準確，靈敏度高，容易判定。

2、試劑組成

“豬藍耳病抗體”快速檢測卡（20 塊）； 說明書1份

3、用途

用于檢測豬血清/血漿/全血樣品中豬繁殖與呼吸綜合癥（又稱藍耳病，以下同，porcine reproductive and respiratory syndrome,prrs）抗體。

4、操作步驟以及結(jié)果判讀：

⑴ 將檢測卡從鋁箔袋中取出，水平放置并做好標記。

⑵ 在檢測卡的加樣孔內(nèi)加入2滴（70-100ul）待檢血清/血漿/全血標本。⑶ 20分鐘內(nèi)觀察并記錄實驗結(jié)果。

陽性：對照線區(qū)（c）和檢測線區(qū)（t）各出現(xiàn)一條紫紅色線。檢測線(t)的顏色越深，表明豬藍耳病抗體的滴度越高。

陰性：只有對照線區(qū)(c)出現(xiàn)一條紫紅色線。

無效：未出現(xiàn)紫紅色線或只在檢測線區(qū)（t）出現(xiàn)紫紅色線，對照線區(qū)（c）未出現(xiàn)紫紅色線。

5、儲存及有效期：

原包裝在2-30℃陰涼避光干燥處儲存，有效期為12 個 月，批號和有效期見包裝盒。

6、注意事項：

(1)檢測卡在室溫下一次性使用。

(2)自來水、蒸餾水或去離子水不能作為陰性對照。

(3)實驗環(huán)境應保持一定濕度，避風，避免在過高溫度下進行試驗。

(4)試劑盒在室溫下保存.如在2-8℃冷藏，使用前降至室溫后方可打開鋁箔袋進行檢測操作。

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